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MitoTracker Red
- names：
MitoMark Red I（線粒體紅色熒光探針）
- CAS號：
167095-09-2
MDL Number： - MF(分子式)： C32H32Cl2N2O MW(分子量)： 531.52
- EINECS: Reaxys Number:
- Pubchem ID:22613925 Brand:BIOFOUNT
| 貨品編碼 | 規格 | 純度 | 價格 (￥) | 現價(￥) | 特價(￥) | 庫存描述 | 數量 | 總計 (￥) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| FMK22114-50ug*10 | 50ug*10 | >98% | ￥ 0.00 | ￥ 0.00 | 2-3days | ￥ 0.00 | ||
| FMK22114-50ug | 50ug | >98% | ￥ 1200.00 | ￥ 1200.00 | 1-2days | ￥ 0.00 |
| 中文別名 | 線粒體紅色熒光探針(MitoTracker Red CMXRos);線粒體紅色熒光探針(167095-09-2);線粒體紅色熒光探針CMXRos |
| 英文別名 | MitoMark Red I;MitoTracker Red CMXRos;MitoTracker Red CMXRos(167095-09-2)；MitoMark-Red-I |
| CAS號 | 167095-09-2 |
| Inchi | InChI=1S/C32H32ClN2O.ClH/c33-19-20-9-11-21(12-10-20)28-26-17-22-5-1-13-34-15-3-7-24(29(22)34)31(26)36-32-25-8-4-16-35-14-2-6-23(30(25)35)18-27(28)32;/h9-12,17-18H,1-8,13-16,19H2;1H/q+1;/p-1 |
| InchiKey | IKEOZQLIVHGQLJ-UHFFFAOYSA-M |
| 分子式 Formula | C32H32Cl2N2O |
| 分子量 Molecular Weight | 531.52 |
| 溶解度Solubility | |
| 性狀 | Solid power |
| 儲藏條件 Storage conditions | Dry, dark and at 0 - 4 C for short term (days to weeks) or -20 C for long term (months to years). |
線粒體紅色熒光探針(MitoMark Red I)操作說明:
1. 儲存液的配制
本品是以粉末形式提供，使用前需將本品回溫至室溫。 之后使用細胞培養級別的無水DMSO將其充分溶解至終濃度1 mM，即向50 µg粉末中加入94 µL DMSO即可。
【注】可根據單次的使用量將儲存液分裝后放到-20℃避光，避免反復凍融。
2. 工作液的配制
備注：根據不同的實驗目的使用不同的探針濃度，以下的起始操作條件僅作參考，可根據細胞類型和其他的相關因素如細胞或組織的透化等進行適當調整。
用適當的緩沖液或者細胞培養基稀釋1 mM儲存液至工作液濃度。一般推薦使用濃度為25-500nM。對于后續需要做固定或透化的樣本，推薦工作濃度為100-500 nM，為了降低過度加載導致的潛在偽影和線粒體毒性，在不影響實驗結果的前提下應盡可能低濃度染色。另外，濃度過高也可能對其他細胞結構進行染色。
3. 染色及檢測
※ 貼壁細胞的染色
培養皿/板內加入適量的培養基覆蓋蓋玻片進行爬片培養。當細胞長至所需豐度，吸除培養液，加入37℃預熱的MitoTracker Red CMXRos染色工作液。在所使用細胞正常培養條件下孵育15-45 min（最佳孵育時間需優化）。染色結束后，使用新鮮培養液或緩沖液替換上述染色液，即可將其置于熒光顯微鏡下觀察或熒光酶標儀下讀數。或者進行后續的固定和透化步驟，見步驟4。
※ 懸浮細胞的染色
離心收集細胞，吸除上清，利用37℃預熱的MitoTracker Red CMXRos染色工作液輕輕重懸細胞。在所使用細胞正常培養條件下孵育15-45 min（最佳孵育時間需優化）。染色結束后，離心收集細胞，利用37℃預熱的新鮮培養液或緩沖液重懸細胞，被染色的細胞可用流式細胞儀、熒光酶標儀、熒光顯微鏡進行分析。
如果需要蓋玻片上固定化的細胞，那么可在鋪片前先用多聚賴氨酸（poly-D-lysine）包被載玻片或蓋玻片。 或者進行后續的固定和透化步驟，見步驟4。
4. 固定和透化
※ 染色結束后，利用培養液或緩沖液清洗細胞。
※ 小心吸走清洗液。換用新鮮配制且預熱的含2-4%甲醛的緩沖液或培養液進行細胞固定。經驗證，本染料MitoTracker® Red CMXRos由含3.7%甲醛的完全培養液于37℃孵育內皮細胞15min能起到良好的固定效果。
※ 清洗細胞：吸除固定液，用適當緩沖液沖洗細胞數次。
※ 細胞透化（可選）：
像ICC等實驗需要細胞要做透化，則可將已固定的細胞直接加入含有去污劑如Triton X-100的緩沖液中孵育。透化結束后，用緩沖液清洗細胞即可進行后續ICC實驗。經檢測，利用含0.2% Triton X-100的PBS孵育內皮細胞10min可以達到良好的透化效果。另外，還可利用預冷的丙酮透化5 min，之后用PBS清洗細胞。經驗證，即使后繼沒有進一步的抗體標記，丙酮透化處理也可降低背景信號。
適用設備：熒光顯微鏡、流式細胞儀、微孔板讀數儀。
| 產品說明 | 線粒體紅色熒光探針CMXRos(CAS:167095-09-2):是一種紅色熒光染料，用于活細胞線粒體的染色。MitoTracker Red CMXRos是一種細胞滲透型的X-rosamine衍生物，包含標記線粒體的弱巰基反應性的氯甲基官能團。 |
| Introduction | MitoMark Red I is a far red fluorescent mitochondrial stain (λmax ~ 594/608 nm). |
| Application1 | |
| Application2 | |
| Application3 |
| 1. Buckman et al (2001) MitoTracker labeling in primary neuronal and astrocytic cultures: influence of mitochondrial membrane potential and oxidants. J.Neuroscience Methods. 104 165 PMID: 11164242 |
| 2. Poot et al (1996) Analysis of mitochondrial morphology and function with novel fixable fluorescent stains. J.Histochem.Cytochem. 44 1363 PMID: 8985128 |
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